Biological screening of herbal extracts and essential oil from Plectranthus species: α-amylase and 5-lipoxygenase inhibition and antioxidant and anti-Candida potentials

Abstract The phenolic compound content, the antioxidant and α-amylase inhibition potentials of different extracts of the Plectranthus amboinicus, P. barbatus and P. ornatus were evaluated. We also evaluated the influence of plant growth and harvest time on the chemical composition of the essential oil (EO) of P. amboinicus, its antioxidant and anti-Candida activities and the α-amylase and lipoxygenase inhibitions. The turbo-extract of P. barbatus showed the greatest phenolic compound content and antioxidant activity. No α-amylase inhibition activity was observed in the analyzed extracts, but the turbo-extraction and refluxing extracts possessed high antioxidant activities. Protected cultivation and morning harvest conditions gave the best antioxidant activities, which was associated to the highest carvacrol content. P. amboinicus EO antioxidant activity could contribute to the reduction of oxidative stress in diabetes. Causal Candida strains of diabetic foot ulcers showed sensitivity to P. amboinicus EO. C. albicans and C. dubliniensis were the most sensitive of the selected Candida strains. Turbo-extracts or refluxing of the three species extracts and the EO of P. amboinicus should be considered as a potential candidate for the management the complications of type 2 diabetes.

Avaliação microbiológica de salames industrializados e artesanais comercializados na cidade de Alfenas ­ MG / Microbiological evaluation of industrialized and artisanal salamis marketed in the city of Alfenas - MG

Os produtos embutidos estão sendo cada vez mais consumidos pela população, devido sua praticidade e durabilidade, além disso, serem muito saborosos. Visando a saúde pública, todos os alimentos devem passar por uma rigorosa inspeção, para garantir que o alimento chegue à mesa do brasileiro com toda garantia e qualidade. Foram pesquisadas cinco marcas de salames provenientes de supermercados e feiras livres da cidade de Alfenas ­ MG, analisadas em duplicata, com duas repetições, sendo essas repetições feitas em intervalos e lotes diferentes para observação da qualidade do produto. Os dados obtidos foram surpreendentes, onde 60% das amostras analisadas apresentaram-se impróprias para o consumo por albergarem Salmonella sp.

Determinação da Atividade Antimicrobiana do Extrato Hidroalcoólico da PlantaPlectranthus ornatus Codd (Boldo Chinês) / Determination of the antimicrobial activity in the hydroalcoholic extract of the plant Plectranthus ornatus Codd (Bilberry Chinese)

A planta Plectranthus ornatus Codd é originária dos países do Mediterrâneo e Oriente Próximo. Na medicina popular é indicada para males do fígado e problemas de digestão. É utilizada no tratamento para o controle da gastrite, na dispepsia, azia, mal-estar gástrico e ressaca. Este trabalho objetiva a avaliação antimicrobiana do extrato de P. ornatus, utilizando-se 15 microrganismos padronizados. Os testes antimicrobianos foram realizados em ágar Mueller Hinton pela técnica de poços. Foram utilizados os testes de microdiluição em caldo, para a determinação da concentração inibitória mínima (CIM) e semeadura, em placas contendo ágar Mueller Hinton para a concentração microbicida mínima (CMM). Os testes de microdiluição em caldo demonstraram que o extrato nas concentrações de 20,31; 325 e 650 mg/mL inibiu o crescimento bacterianode Bacillus cereus, Streptococcus pyogenes e Enterococcus faecalis, respectivamente. Para o fungo Saccharomyces cerevisiae os testes de microdiluição demonstraram inibi- ção do crescimento na concentração de 1.300 mg/mL. Para as demais cepas testadas, o extrato não demonstrou atividade. Em decorrência da crescente resistência múltipla microbiana aos antibióticos, pesquisas para o desenvolvimento de novos medicamentosque sejam economicamente viáveis e com margem de segurança efetiva têm ganhado espaço na comunidade científica.

Plectranthus ornatus Codd is a plant from Mediterranean and Near East countries. It is indicated for liver illnesses and digestion problems in popular medicine. It is used in the treatment for the control of gastritis, dyspepsia, heartburn, gastric discomfort, and hangover. This study aims to evaluate the antimicrobial activity in extracts of P. ornatus using 15 standardized micro-organisms. Antimicrobial tests were performed on Mueller Hinton agar through the technique of wells. Broth microdilution tests were used for the determination of the minimum inhibitory concentration (MIC), and seeding on plates containing Mueller Hinton agar for the determination of the minimum microbicide concentration (MMC). The broth microdilution tests demonstrated that the extract inhibited the growth of Bacillus cereus, Streptococcus pyogenes, and Enterococcus faecalis at the concentrations of 20.31, 325, and 650 mg/mL, respectively. The microdilution tests showed growth inhibition of Saccharomyces cerevisiae at a concentration of 1,300 mg/mL. The extract did not show inhibitory activity on the other tested strains. As a result of increased multiple resistances to antibiotics,microbial research in the development of new drugs that are economically viable and offer an effective safety margin have won space in the scientific community.

Teste de sensibilidade ao quefir de cepas de Candida sp. isoladas de vulvovaginites / Test of sensitivity to kefir of Candida spp. strainsisolated from vulvovaginitis

A candidíase vulvovaginal é uma inflamação da mucosa genital que se desenvolve em decorrência de infecção por leveduras do gênero Candida, as quais são habitantes normais do canal vaginal. O quefir é um probiótico que se apresenta em grãos ou grumos, formado por diversos microrganismos, como por exemplo, várias espécies de Lactobacillus e leveduras, que vivem em um complexo sistema de simbiose adsorvidos em uma matriz de polissacarídeos secretados pelo mesmo. O presente estudo foi realizado com o objetivo de isolar e identificar leveduras de vulvovaginites recorrentes e testar in vitro a ação do quefir sobre estes microrganismos. Para o isolamento e identificação utilizou-se CHROMagar-Candida e confirmação bioquímica. O antibiograma foi realizado pela técnica de poços. Das 44 amostras coletadas, 40,91% foram positivas para Candida sp., as quais mostraram prevalência das espécies não-albicans (52,63%) sobre as espécies de C. albicans. No antibiograma, houve uma sensibilidade de 68,42% de ambas as populações à suspensão de quefir, enquanto para o mesmo, veiculado em base não-iônica, houve redução do espectro de ação. Concluiu-se que a suspensão foi mais eficaz em relação à sua associação com base não iônica, o que torna inviável a veiculação desta formulação.

Vulvovaginal candidiasis is an inflammation of the genital mucosa that develops as a result of infection by Candida yeast species, which are normal inhabitants of the vagina. Kefir is a fermented-milk probiotic produced in the form of grains or flakes, by a symbiotic complex of microorganisms, among them several species of lactic-acid bacteria and yeasts, which live encapsulated in a matrix of polysaccharides secreted by the former. This study was conducted to isolate and identify yeasts from recurrent vulvovaginitis and test in vitro the action of kefir on these microorganisms. For the isolation and identification of Candida organisms, CHROMagar-Candida and biochemical confirmation were employed. Overall antimicrobial susceptibility was determined by the agar well diffusion technique. Of the 44 samples, 40.91% were positive for Candida spp., which showed a prevalence of non-albicans species (52.63%) over the species C. albicans. In the antibiogram (in vitro susceptibility test), there was a sensitivity of 68.42% of both populations to the suspension of kefir alone, while for kefir carried in a non-ionic cream base, the spectrum of action was reduced. It was concluded that the suspension was more effective alone than when combined with a non-ionic base, making it impractical to use this formulation.

Análise micológica e toxicológica em amendoim e derivados / Mycological and toxicological analysis of peanuts and derivatives

The filamentous fungi Aspergillus flavus, Aspergillus parasiticus and Aspergillus nomius produce toxins, which are secondary metabolites called aflatoxins. These toxin-producing species grow rapidly on peanuts and cereals in favorable conditions of temperature and humidity. Their toxins can either cause acute effects, and even be lethal or accumulate in the organism, resulting in liver cancer in the long term. Based on the health risks of aflatoxins in food, a research was conducted on peanuts and derivatives sold in Alfenas, MG, Brazil, to evaluate the presence of Aspergillus sp. and aflatoxins. The samples were randomly collected at ?popular stores?, from November 2008 to May 2009, to assess the occurrence of aflatoxins B1, B2, G1 and G2 by thin layer chromatography (TLC). The mycological analysis revealed the presence of fungi in 50% of the samples: Penicillium sp. (53.85%), A. flavus (19.23%), A. niger (15.38%) and A. fumigatus (11.54%), and 63.64% of these showed the presence of aflatoxins : B1 (43.14%), B2 (25.49%), G1 (23.53%) and G2 (7.84%). It is concluded that the results reported here are a cause for concern, given the harmfulness of these cumulative and carcinogenic toxins.

As espécies Aspergillus flavus, Aspergillus parasiticus e Aspergillus nomius produzem micotoxinas, que são metabólitos secundários denominados de aflatoxinas. Desenvolvem-se rapidamente em amendoins e cereais produzindo esta toxina, quando em condições favoráveis de temperatura e umidade. Essas toxinas podem produzir efeitos agudos, letais ou não, ou efeito cumulativo no organismo, que a longo prazo, podem causar, principalmente, lesões carcinogênicas hepáticas. Sabendo-se dos riscos à saúde, devido à presença de aflatoxinas nos alimentos, foi realizada uma pesquisa em amendoins e derivados comercializados na cidade de Alfenas ? MG, Brasil, para avaliar a presença de aflatoxinas e de fungos do gênero Aspergillus sp. Amostras foram coletadas aleatoriamente em lojas populares no período de novembro de 2008 a maio de 2009 e avaliada a ocorrência de aflatoxinas B1, B2, G1 e G2, utilizando-se a técnica de Cromatografia de Camada Delgada (CCD). Na análise micológica foi constatada a presença de fungos em 50% das amostras, das espécies: Penicillium sp. (53,85%), A. flavus (19,23%), A. niger (15,38%), A. fumigatus (11,54%). Obteve-se como resultado para a presença de aflatoxinas 63,64 %, sendo: B1 (43,14%), B2 (25,49%), G1 (23,53%), G2 (7,84%). Concluiu-se que os números encontrados são preocupantes, tendo em vista a periculosidade desta substância

Efeito do extrato hidroalcoólico de Pyrostegia venusta na mutagênese "in vivo", e avaliação antimicrobiana, e interferência no crescimento e diferenciação celular "in vitro" / Effect of the hydroalcoholic extract of Pyrostegia venusta on "in vivo" mutagenesis and antimicrobial evaluation and interference on the "in vitro" cellular growth and differentiation

Analisa-se a atividade antibacteriana e antifúngica, o crescimento, a diferenciação celular e a ação mutagênica do extrato hidroalcoólico de Pyrostegia venusta (cipó- de-são-joão) em Herpetomonas samuelpessoai. As atividades antimicrobianas foram analisadas por intermédio de métodos de difusão em ágar e macrodiluição. O crescimento e a diferenciação celular de H. samuelpessoai foram realizados em meio quimicamente definido a 28ºC/48 h e analisados quantitativa (câmara de Neubauer) e qualitativamente (formas pró/para/opistomastigota) após coração panótica. A avaliação mutagênica foi realizada pelo teste do micronúcleo em eritroblastos de camundongos Swiss albinus após tratamentos via gavagem (1.000-2.000mg/kg) e decorridos os tempos de 24-48 h. Os resultados mostraram: a) ausência de atividade antimicrobiana para todas as cepas testadas, isto é, B. cereus, B. stearothermophilus, B. subtilis, E. aerogenes, E. coli, K. pneumoniae, M. luteus, P. mirabilis, P. aeruginosa, S. typhimurium, S. aureus, S. epidermidis, S. pyogenes, S. salivarius, C. albicans, C. neoformans e S. cerevisiae, independentemente das concentrações (72,6-145,2 mg/mL); b) ausência de efeitos sobre o crescimento e a diferenciação celular de H. samuelpessoai; c) ausência de efeitos potencialmente clastogênico e/ou aneugênico, independentemente de sexo, tempo e dosagem. Esses dados sugerem que o extrato de Pyrostegia venusta é seguro, podendo ser administrado por via tópica e oral, uma vez que não apresenta potencial carcinogênico/mutagênico. Pelas condições propostas o mesmo não deve ser usado como antimicrobiano.

This study aimed at analyzing the antibacterial and antifungic activity, the cell growth and differentiation in Herpetomonas samuelpessoai and the mutagenic action of the hydroalcoholic extract of Pyrostegia venusta (flame vine; ?cipó-de-são-joão? in Brazil). Antimicrobial activities were determined by agar diffusion and macrodilution techniques. Cellular growth and differentiation of H. samuelpessoai were assessed in a chemically defined medium at 28ºC/48 hours and quantitatively (Neubauer chamber) and qualitatively (pro-/para-/opistomatigote forms) analyzed after panoptic staining. Mutagenesis was evaluated by the micronucleus test in erythroblasts of Swiss albinus mice after treatment by gavage (1000-2000mg/kg) and 24-48 hours. The results showed (i) absence of antimicrobial activity for all the strains tested: B. cereus, B. stearothermophilus, B. subtilis, E. aerogenes, E. coli, K. pneumoniae, M. luteus, P. mirabilis, P. aeruginosa, S. typhimurium S. aureus, S. epidermidis, S. pyogenes, S. salivarius, C. albicans, C. neoformans and S. cerevisiae, independently of the concentrations (72.6-145.2mg/mL; (ii) absence of effects on the cellular growth and differentiation in H. samuelpessoai; and (iii) absence of potentially clastogenic and/or aneugenic effects, independently of sex, time and dose. These data suggest that the Pyrostegia venusta extract can safely be used topically and orally, once they do not exhibit carcinogenic/mutagenic effects, but under the conditions of this experiment it should not be used as antimicrobial agent.

Análise microbiológica da água de bebedouros de escolas municipais da cidade de Alfenas / Microbiological analysis of drinking water from municipal schools of the city of Alfenas

Este trabalho teve como objetivo determinar a qualidade microbiológica da água consumida nos bebedouros de escolas municipais da cidade de Alfenas. Foram realizadas análises para detectar mesófilos aeróbios; bolores e leveduras; psicrófilos e coliformes a 35ºC - 45ºC. Trinta e oito amostras de água dos bebedouros foram analisadas e em 100% das amostras não se detectaram coliformes a 35ºC, 45ºC, e psicrófilos. Foram detectados para mesófilos, bolores e leveduras valores máximos de 5,8 x 10³ UFC/ mL e 2,1 x 10 UFC/mL de água, respectivamente. Com relação ao número de mesófilos, este se encontrava fora dos padrões vigentes (Portaria nº518 e nº36 do Ministério da Saúde), uma vez que, quando superiores a 500 UFC/mL, recomendam-se novas análises. Quanto aos valores para bolores e leveduras, O Ministério da Saúde não determina padrões para os mesmos. Portanto, para este parâmetro, as amostras analisadas encontram-se sob grau de potabilidade aceito para consumo.

Ensaios de atividade antimicrobiana in vitro e mutagênica in vivo com extrato de Vernonia polyanthes Less (Assa-peixe) / Analysis on the in vitro antimicrobial activity and in vivo mutagenicity by using extract from Vernonia polyanthes Less (Assa-peixe)

Neste estudo foram analisados os efeitos do extrato hidroalcoólico de Vernonia polyanthes Less (Assa-peixe) sobre crescimento e diferenciação celular do protozoário Herpetomonas samuelpessoai, a susceptibilidade antimicrobiana in vitro, a dose letal média (DL50) e a mutagenicidade in vivo (teste do micronúcleo). A inibição do crescimento de H.samuelpessoai foi evidenciada, quando exposto às concentrações crescentes do extrato, embora sem aparecimento de forma diferenciada de opistomastigota, em percentual relevante. As linhagens-padrão de Bacillus cereus, Escherichia coli, Proteus mirabilis, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes e Salmonella Typhimurium mostraram halos de inibição quando expostas ao extrato de V. polyantes Less. Contudo, os efeitos bacteriostáticos foram observados em Bacilus cereus(180,1 mg/mL), Escherichia coli (72,04 mg/mL) e Proteus mirabilis (144,08 mg/mL). A avaliação mutagênica do extratode V. polyanthes Less revelou ausência e moderado efeito clastogênico e/ou aneugênico, respectivamente, nas dosagens de 1000 e > 1500 mg/Kg, independentemente do tempo de tratamento (24/48 h) e do sexo do animal. Tais resultados foram sugestivos de ocorrência de toxicidade sistêmica, em virtude de aumento de eritrócitos normocromáticos na medula óssea dos camundongos, que também ocorreram independentemente da dose, gênero e tempo de tratamento. Contudo, a ausência de DL50 foi observada em todas as concentrações testadas (250-2000 mg/Kg).

Análise da carga contaminante de agrotóxicos e bactérias em peixes da represa de Furnas / Analysis of the contaminant load of agrotoxic and bacteria in fish from the Furnas reservoir

O modelo agrícola brasileiro permite o uso intensivo de agrotóxicos, com possível contaminação dos corpos hídricos e a consequente bioacumulação de resíduos em peixes, cuja microbiota é influenciada pelo ambiente. Devido à sua importância na alimentação se objetivou avaliar a presença de agrotóxicos e a carga microbiana em peixes que vivem na represa de Furnas, em Minas Gerais. Realizaram-se análises das concentrações de agrotóxicos e dos micro-organismos encontrados em tilápias coletadas em vários municípios (Alfenas, Areado, Fama e Alterosa). A análise microbiológica revelou presença de mesófilos numa variação de 1,45 x 102 a 1,2 x 108 UFC/g coliformes a 35°C, de < 3 a 1,3 x 103 NMP e Salmonella sp. apenas no município de Alterosa. Segundo o Programa de Controle de Resíduos em Pescado (PCRP/2008), a Portaria n° 518/ MS de 2004 e a Legislação da Comunidade Europeia, verificou-se presença dos seguintes agrotóxicos acima dos limites máximos de resíduos (LMRs) permitidos nas amostras de peixes: Delta-BHC (0,38 mg/kg) e Endossulfan (3,18 mg/kg), na cidade de Areado Lindano e b-BHC (em concentrações diferentes: 1,20 mg/kg num ponto e 0,84 mg/kg em outro) Heptacloro (0,24 mg/kg) Heptacloro epóxi e Aldrin (em diversas concentrações, em pontos diferentes: 2,14 mg/kg, 1,34 mg/kg e 2,47 mg/kg), e Endossulfan (0,6 mg/kg) na cidade de Alfenas Lindano e b-BHC (0,87 mg/kg) e Delta-BHC (0,06 mg/kg), na cidade de Fama. Estes resultados indicam contaminação nestas áreas acima dos LMRs permitidos pela legislação brasileira e europeia.

Isolamento e identificação de bactérias facultativas mesofílicas em carnes frescas bovinas e suínas / Isolation and the presence of mesophilic bacteria in fresh beef and pork

Avaliou-se a contaminação de carnes frescas, bovinas e suínas, por bactérias mesofílicas. Foram feitas as seguintes determinações quantitativas: contagem total de bactérias mesofílicas, empregando agar padrão para contagem; determinação do NMP de coliformes totais e fecais, através do método cromatogênico de substrato definido (Colilert); contagem, isolamento e identificação de Staphylococcus aureus e contagem, isolamento e identificação de Salmonella sp. As amostras foram coletadas em 20 açougues da cidade de Alfenas-MG, simulando a compra pelo consumidor. De cada açougue, foram analisadas 6 amostras, 3 de carne bovina e 3 de suína, em diferentes dias da semana. Segundo a portaria nÝ451, de 19 de setembro de 1997 da Secretaria da Vigilância Sanitária do Ministério da Saúde, para carnes "in natura", não existem padrões microbiológicos de referência relativos a tais microrganismos. Nas análises, encontrou-se, nas carnes suínas, uma variação de 4 x 100 a 7,3 x 100000UFC/g na contagem padrão; de 0 a 2,8 x 1000 para Staphylococcus aureus; de 0 a 2,4 x 1000 para coliformes totais; de 3,6 x 0,10 a 2,4 x 1000 para coliformes fecais. Nas carnes bovinas, houve uma variação de 3 x 100 a 7,9 x 100000 UFC/g na contagem padrão; de 0 a 5,9 x 1000 para Staphylococcus aureus; de 0 a 2,4 x 1000 para coliformes totais e fecais. A pesquisa de Salmonella mostrou-se negativa para todos os ensaios realizados. A Secretaria Municipal de Abastecimento e o Departamento de Inspeção Municipal de Alimentos da Cidade de São Paulo apresentam os seguintes padrões: contagem em placa (máximo: 3 x 1000000/g), Coliformes de origem fecal (máximo: 2 x 100/g) e Salmonella (ausência em 25 g). Conclui-se, que as carnes consumidas na cidade de Alfenas apresentam-se contaminadas, segundo o padrão exigido pela Secretaria Municipal de Abastecimento e o Departamento de Inspeção Municipal de Alimentos da Cidade de São Paulo, quanto à presença de coliformes. Portanto, as condições higiênico-sanitárias das carnes comercializadas na cidade de Alfenas encontram-se deficientes e devem ser melhoradas nas diversas etapas do processamento.